「細胞の乱れを理解しよう」

開催趣旨

細胞培養は、初心者と熟練者では、結果に差が出てきます。しかしながら、熟練者といえども、安定した結果を出すことは容易ではありません。 安定性・再現性・生産性の実現には、工学的観点と生物学的な観点を理解する必要があります。この度、大阪大学大学院工学研究科の先生方のご協力のもと、本セミナーを実現することができました。

本セミナーは、以下の二部構成で実施します。

• 第一部　細胞培養に関する講演とパネルディスカッション
• 第二部　研究室見学

細胞培養において再現性の良いデータを取得したい方、細胞培養でお悩みの方等のご参加をお待ちしております。

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【重要】本セミナー運営のため、当該セミナー参加者の氏名、所属する団体名、部署名を掲載した参加者名簿を共催・協賛担当者にお渡しすることに同意頂きますようお願い致します。

【重要】登録頂きました連絡先情報は研究会運営のため研究会事務局にて管理し、事務局からの連絡、一般社団法人スクリーニング学研究会主催・共催のセミナー等の案内に利用致します。事前の承諾なく個人情報を第三者に提供することはありません。
 

講演１

大阪大学大学院工学研究科
ローツェライフサイエンス細胞培養工学共同研究講座
招へい准教授　幡多徳彦

演題名

培養インキュベータの温度環境が細胞接着挙動に与える影響

要旨

再生医療や創薬の研究分野で行われている細胞培養では、再現性と安定化が必須条件であり、それらの実現に培養操作の機械化は少なからず寄与している。しかし手作業での培養操作条件の全てが最適化されている訳ではなく、機械化を目的とした操作条件の検討が必要である。そこで本研究開発では、培養開始後24時間の培養画像を用いた細胞接着挙動に対する客観的かつ定量的な評価方法を構築し、培養インキュベータの温度環境が細胞接着挙動に与える影響について評価した。

本実験では、モデル細胞として株化された間葉系幹細胞2株（骨髄由来JCRB1136、臍帯血由来JCRB1546）を用い、接着細胞培養90mmDishによる培養を行った。細胞接種の操作条件は、アダプターに設置したDishと細胞懸濁液を接種した培地入りの遠沈管を加温（37℃）、室温、冷蔵の3温度下で保管し、安全キャビネットにて各温度にて保管したDishと細胞懸濁液を用いて細胞接種を行った。接種したDishは搬送装置を用いてインキュベータ（37℃、5%CO2）へと搬送し、培養開始後24時間に細胞観察装置を用いて撮影可能なDishの培養面を撮影し、LabViewを用いた画像処理により撮影した培養画像における接着細胞数を計測した。そして培養インキュベータでの細胞接着挙動について、細胞接種における操作温度および弊社培養装置CellKeeperⅡ120のインキュベータにおけるDish設置位置の影響評価を実施し、細胞接種操作の再現性と安定化について検討を行ったので報告する。

講演２

大阪大学大学院工学研究科生物工学専攻
生物プロセスシステム工学領域　主幹教授
（兼）工学研究科テクノアリーナ細胞製造コトづくり拠点　拠点長　
紀ノ岡正博

演題名

細胞の気持ちを理解して育む技術を構築する

要旨 

日々の幹細胞培養において、いつも通りの培養ができない、データのばらつきが大きい、データに外れ値が存在するなど困ることが多分にあります。これは、培養の乱れに対する理解が進んでおらず、避けがたい事象としてあきらめているためと思います。乱れを引き起こす原因については、工程初期の乱れ（細胞播種密度の揺らぎなど）、培養工程中における乱れ（培養操作由来、培養環境由来、または、細胞自身由来の乱れ）、培養工程終了後の測定由来の乱れ（細胞カウントの誤差など）などが挙げられます。 細胞製造コトづくり拠点では、培養工程においては、細胞の気持ちを理解する活動が欠かせないものであり、細胞分裂、遊走、細胞間接着、細胞基質間接着などの細胞挙動と伴うメカノトランスダクションに着目し、理解促進を行っております。培養工程特性と細胞特性、両者を理解することで、乱れの原因に辿り着き、細胞培養評価手法、培養操作の自動化などオン技術を構築し、細胞調製の安定化を目指しております。本講演については、乱れの事例を紹介し、皆さんと議論できればと思います。