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タイトル

HTRF®法によるマラリア原虫・ヒト間タンパク質相互作用を阻害する化合物のスクリーニング系の構築とその応用

要旨

マラリアは世界三大感染症の一つに数えられる熱帯感染症である。これまでに我々は熱帯熱マラリア原虫のSERA5（Serine Repeat Antigen 5）タンパク質のＮ−末端領域（P47ドメイン）を改良したSE36マラリアワクチンを開発中であり、その有効性を報告してきた。一方、P47ドメイン本来の役割については明らかではない。そこで我々は、P47ドメイン本来の役割を明らかにすることを目的として、P47ドメインと直接結合する血清タンパク質を同定した。次にこの結合の意味を明らかにするために、HTRF®法（ホモジニアス時間分解蛍光エネルギー転移測定法）を用いて、この結合を阻害する低分子化合物の同定を試みた。HTRF®法は洗浄工程がないために操作が簡便で、結果のばらつきが小さいことから大規模なスクリーニングに適している一方、我々が目的とするタンパク質間相互作用を阻害する化合物のスクリーニングは既存のキットでは対応できない。そこで本研究において新たに384プレートベースのハイスループットスクリーニング（HTS）のためのアッセイ系を構築した。本スクリーニング系により、大阪大学産学連携本部が所有する３種の既存薬ラブラリー（約4,700化合物）を用いてスクリーニングを行った結果、14種類の低分子化合物を同定した。本発表では構築したスクリーニング系、および同定した低分子化合物のマラリア原虫への影響について議論する。