発表者

山口朋奈 石原産業(株)ライフサイエンス事業本部医薬品開発部
藤枝貴行 石原産業(株)ライフサイエンス事業本部医薬品開発部
八木隆晴 石原産業(株)ライフサイエンス事業本部医薬品開発部
近藤由隆 石原産業(株)ライフサイエンス事業本部医薬品開発部
福島寛隆 石原産業(株)ライフサイエンス事業本部医薬品開発部
加藤文法 石原産業(株)ライフサイエンス事業本部医薬品開発部
黒田賢聖 石原産業(株)ライフサイエンス事業本部医薬品開発部
林 邦忠 大阪大・産学連携本部
布村一人 大阪大・産学連携本部
金 允政 大阪大・産学連携本部
金田安史 大阪大・院医・遺伝子治療学 

タイトル

GenomONE-Si(HVJ-Eベクター)を用いた導入が難しい細胞へのsiRNA/miRNAのハイスループットスクリーニング

要旨

HVJ Envelope(HVJ-E)は、センダイウイルス(Hemagglutinating virus of Japan)の細胞膜融合能を保持したままゲノムを完全に不活化した粒子で、通常の実験室レベルで安全に使用できる非ウイルス性のトランスフェクションツールである。HVJ-E粒子内にsiRNA/miRNA、プラスミドDNA、抗体、タンパク質などを封入してHVJ-Eベクターとし、膜融合活性を利用して標的細胞に分子を導入できる。  small RNA導入に特化したGenomONE-Siは、リポフェクション法では一般的に導入が難しいとされる浮遊系免疫細胞株や初代培養免疫細胞に対して低毒性・高効率でsiRNA/miRNAを導入できた。さらに技術改良を行い、プレート上で簡便に調製できるハイスループットスクリーニング方法を確立し、自動ディスペンサーシステムを使用しても浮遊系免疫細胞株に対する機能的なsiRNA/miRNAの選抜が手作業と同レベルで可能な事を確認した。